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多功能细胞分离液

货号（SKU）
PX10001

低粘度、无毒、自发成梯度； 细胞、亚细胞器与病毒的多功能型密度梯度分离介质

价格范围：¥200.00 至 ¥1,800.00 会员价不高于¥1,764.00，注册成为会员
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中文名
多功能细胞分离液
英文名
Purescix Multifunctional Cell Separation Medium
货号
PX10001

Purescix 多功能细胞分离液是经过多重实验验证的密度梯度离心介质，可用于细胞、病毒及亚细胞颗粒的分离制备。产品作用机理、实验操作流程与 Percoll 保持高度兼容，可作为 Percoll 的高性能等效替代试剂。

产品简介

多功能细胞分离液为经典密度梯度离心介质，由粒径 15–30 nm 胶体二氧化硅颗粒配制成水溶液；颗粒表面包覆单分子层聚乙烯吡咯烷酮（PVP），游离 PVP 含量仅 1%–2%。

产品化学惰性强、基本无细胞毒性，不与生物膜发生粘附，适用于活细胞、沉降系数≥60 S的亚细胞组分及病毒样本分离；可在 200–1000 g 低离心力条件下，数分钟至数十分钟内完成分离。整体实验条件温和，能够最大限度维持细胞活力与形态完整。

多功能细胞分离液不穿透生物膜，离心过程中不改变颗粒的浮力密度；梯度稳定性好，可提前预制，实验重现性高。分离后介质通常无需去除，不干扰流式细胞术、电子细胞计数等下游检测及后续细胞培养。

性状与指标

参数 信息
产品组成 PVP 包被的胶体二氧化硅溶液
CAS 号 65455-52-9
颗粒直径 15–30 nm
密度 1.130 ± 0.005 g/mL
渗透压 < 25 mOsm/kg H₂O
粘度 ≤ 15 cP（20°C）
电导率 < 100 mS/m
pH 8.5–9.5（20°C）
外观 无色至微黄色液体
储存条件 常温可稳定保存5年（强烈推荐2-8℃保存）
运输条件 常温运输
是否无菌 无菌

 

应用场景：

包括但不限于以下使用场景：

  • 外周血单个核细胞（PBMC）、淋巴细胞亚群分离
  • NK 细胞（大颗粒淋巴细胞 LGL）富集
  • 淋巴母细胞纯化与死细胞去除
  • 肝细胞、Kupffer 细胞、骨髓细胞等原代细胞分离
  • 线粒体、溶酶体、过氧化物酶体、细胞核等亚细胞器分离
  • 病毒、细菌分离纯化
  • 受损细胞及碎片与完整活细胞的分离

常用检测方法/平台：密度梯度离心（角转头/水平转头）、流式细胞术、细胞培养

 

下述为内部方案验证完备、可提供详细实验方案的细胞类型（详见说明书及实验指南）：

  • 肝实质细胞与肝非实质细胞
  • 全血PMBC
  • 小肠上皮免疫细胞
  • 小鼠骨髓中性粒细胞

 

附：典型生物颗粒分离密度参考

样品类型 浮力密度 (g/mL) 分离后位置
血小板(Platelet) <1.04 上层或漂浮液体表面
淋巴细胞(Lymphocyte) 1.055-1.065 中层，界面
单核细胞(Monocyte) 1.060-1.068 中下层
嗜中性粒细胞(Neutrophil) 1.080-1.090 下层
红细胞(Erythrocyte) >1.09 底部沉淀层
细胞质(Cytoplasm) <1.05 上层或漂浮
微粒体(Microsome) 1.09-1.12 中层
溶酶体(Lysosome) 1.12-1.15 中下层
线粒体(Mitochondria) 1.17-1.20 下层
细胞核(Nucleus) >1.20 最底部

表7. 常见细胞、亚细胞器在多功能细胞分离液梯度中的浮力密度及预测位置

注意事项

  1. 为了确保操作人员的安全与健康，实验全过程请务必穿戴实验服并佩戴一次性手套。
  2. 本品所附带的部分产品技术信息仅供客户参考、学术交流与科学研究之用；我司不对所提供信息的绝对权威性与完整性作担保。
  3. 本品仅供科学研究使用，严禁用于临床诊断、治疗、食品及药品等任何人体相关用途，禁止存放于普通住宅。
  4. 自发形成梯度请使用角转头，不推荐水平转头；预制梯度分离细胞时可使用水平转头。
  5. 多功能细胞分离液 原液渗透压极低（< 25 mOsm/kg），不可直接用于细胞分离，使用前必须配制为等渗工作液。
  6. 高压灭菌仅适用于未添加盐或蔗糖的 多功能细胞分离液 原液（120°C，30 min）；盐会引起糊化，蔗糖会引起焦糖化。灭菌时尽量减少与空气接触（使用窄口瓶），如有颗粒形成可过滤或低速离心去除；如有明显蒸发，用无菌水补足体积以免影响密度。
  7. 本品强烈建议2-8℃保存，- 20°C 储存最多 6 个月。
  8. 预制梯度在无菌、无物理扰动条件下可保存数周而不改变梯度形状。
  9. 本品不干扰流式细胞术和电子细胞计数仪检测，对细胞培养无明显损伤。

产品数据

PBMC分离测试

取小鼠全血经 D-Hank’s 液稀释后，分别采用 Purescix PX10001 及进口同类产品开展 PBMC 分离，收集样品进行流式细胞术检测。
如图 1 所示，小鼠全血 PBMC 分离实验中，宏观分层现象与进口同类产品基本一致：血清相与分离介质之间形成富集多种免疫细胞的白膜层，红细胞沉降于管底。

图1. 进口C品牌产品（左）与Purescix PX10001（右）全血PBMC分离效果宏观对比

图2进口C品牌产品与Purescix PX10001流式细胞术检测分离免疫细胞效果

注：P1:CD45阳性，全体免疫细胞；P2:CD3阳性，T淋巴细胞；P3:CD19阳性，B淋巴细胞；P4:CD4阳性CD3阳性，CD4T淋巴细胞；P5:CD8阳性CD3阳性，CD8T淋巴细胞；P6:CD11b阳性Ly6G阴性，单核细胞；P7:CD11b阳性Ly6G阳性，中性粒细胞

总免疫细胞数 T淋巴细胞数 B淋巴细胞数 CD4T淋巴细胞数 CD8T淋巴细胞数 单核细胞数 中性粒细胞数
进口C品牌产品 7594 3939 1695 2270 1242 949 74
Purescix PX10001 17950 8719 5601 5614 2657 1597 180

表1：进口 C 品牌产品与 Purescix PX10001免疫细胞收获数对比

T淋巴细胞活率 其他类型细胞活率
进口C品牌产品 99.19% 98.96%
Purescix PX10001 99.35% 98.93%

表2：进口C品牌产品与Purescix PX10001分离免疫细胞活率统计

流式数据分析显示，同等实验条件下，使用 Purescix PX10001 分离得到的总免疫细胞数量更高，细胞活率与进口产品相当。

肝实质细胞分离测试

小鼠肝脏剔除胆囊后制备肝细胞悬液，粗肝细胞经70% PX10001等渗工作液分离，部分细胞7AAD染色流式检测活率，其余铺板37℃培养，次日观察贴壁状态。

图2 进口C品牌产品（左）与Purescix PX10001（右）分离肝实质细胞效果宏观对比

如图2分离小鼠肝实质细胞时，仅从宏观角度观察，与进口C品牌表现基本一致。最上层为死细胞，离心管底部为目标细胞。

图3进口C品牌产品与Purescix PX10001流式细胞术检测肝实质细胞分离效果

肝实质细胞数 肝实质细胞活率
进口C品牌产品 15935 91.34%
Purescix PX10001 40399 91.31%

表3. 进口C品牌产品与Purescix PX10001分离肝实质细胞数及活率统计

流式数据分析（通过颗粒大小判断）显示，同等实验条件下，使用 Purescix PX10001 分离得到的总细胞数量更高，细胞活率与进口产品相当。

图4 进口C品牌产品（左）与Purescix PX10001（右）分离肝实质细胞贴壁情况

分离得到的肝实质细胞于含10%FBS的WilliamsE培养基中过夜培养，次日拍照观察贴壁情况，发现使用进口产品和PX10001分离获得的肝实质细胞贴壁率相当。

肝非实质细胞分离测试

小鼠肝脏剔除胆囊后制备肝细胞悬液，按比例配制100%、33%、66% PX10001等渗工作液，采用双层密度梯度分离粗肝非实质细胞，离心后于两层介质界面收获活细胞白膜层。

收集细胞经洗涤后，部分样本7AAD染色流式检测活率，剩余细胞铺板37℃培养，次日观察细胞贴壁状态。

图5 进口C品牌产品（左）与Purescix PX10001（右）分离肝非实质细胞效果宏观对比

图6进口C品牌产品与Purescix PX10001流式细胞术检测肝非实质细胞分离效果

肝非实质细胞数 肝非实质细胞活率
进口C品牌产品 145104 93.77%
Purescix PX10001 100101 93.89%

表4. 进口C品牌产品与Purescix PX10001分离肝实质细胞数及活率统计

流式数据分析（通过颗粒大小判断）显示，同等实验条件下，使用PX10001分离获得的肝非实质细胞数量更高与细胞活率与进口产品相当。

图7 进口C品牌产品（左）与Purescix PX10001（右）分离肝非实质细胞贴壁情况

分离得到的肝非实质细胞于含10%FBS的DMEM培养基中过夜培养，次日拍照观察贴壁情况，发现使用进口产品和PX10001分离获得的肝非实质细胞贴壁率相当。

骨髓中性粒细胞分离测试

轻柔吹打红骨髓获得单细胞悬液，采用长针头缓慢铺制 52%、64%、72% 三层 PX10001 密度梯度（分层界面清晰）；离心后自上而下形成死细胞、淋巴 / 单核及未成熟中性粒细胞、中性粒细胞、红细胞四层。

图8 进口C品牌产品（左）与Purescix PX10001（右）分离骨髓中性粒细胞分离效果宏观对比

图9进口C品牌产品与Purescix PX10001流式细胞术检测骨髓中性粒细胞分离效果

注：P2:中性粒细胞，CD11b和Ly6G双阳；P3：单核细胞，CD11b阳性，Ly6G阴性；P4：中性粒细胞-7AAD；P5：单核细胞-7AAD

 

试管名称： 中性粒细胞数 单核细胞数 中性粒细胞占比 单核细胞占比 中性粒细胞活率 单核细胞活率
未纯化骨髓细胞混悬液 76991 17831 61.12% 14.15% 94.22% 98.26%
进口C品牌产品 282619 11204 89.79% 3.56% 99.26% 99.13%
Purescix PX10001 306509 13277 86.87% 3.76% 99.37% 99.25%

表5. 进口C品牌产品与Purescix PX10001分离肝实质细胞数及活率统计

数据分析显示，相对于未分离细胞混悬液，中性粒细胞得到一定程度富集、占比增加，且单核细胞占比显著减少。同等实验条件下，使用 Purescix PX10001 分离得到细胞数、活率与进口C品牌产品基本一致。

图10 进口C品牌产品（左）与Purescix PX10001（右）分离骨髓中性粒细胞贴壁情况

相同测试条件下，多个显微镜视野下，Purescix PX10001的细胞分布形态与竞品基本保持一致。

小鼠小肠免疫细胞分离测试

分离小鼠小肠（幽门盲肠段），剪为肠组织碎片；使用细胞提取液处理后，加入 4 mL 40% Percoll 等渗工作液，吹打混匀细胞并离心，结束后，脂肪细胞在最上层，免疫细胞在离心管底

离心收集管底富集的免疫细胞，利用流式抗体进行免疫荧光染色，完成流式检测。数据分析显示，相同的实验条件下，使用 Purescix PX10001 分离得到细胞数、活率优于进口C品牌产品。

图11. 进口C品牌产品（左）与Purescix PX10001（右）分离小鼠小肠上皮免疫细胞效果宏观对比

图12 进口C品牌产品与Purescix PX10001流式细胞术检测小肠上皮免疫细胞分离效果

总免疫细胞数 T淋巴细胞数 B淋巴细胞数 CD4T淋巴细胞数 CD8T淋巴细胞数
进口C品牌产品 26666 13301 7392 1659 9858
Purescix PX10001 35958 24992 6292 2848 19316

表6. 进口C品牌产品与Purescix PX10001分离肝实质细胞数及活率统计