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多功能细胞分离液-密度梯度离心介质

货号（SKU）
PX10001

低粘度、无毒、自发成梯度； 细胞、亚细胞器与病毒的多功能型密度梯度分离介质

价格范围：¥200.00 至 ¥1,800.00
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中文名
多功能细胞分离液-密度梯度离心介质
英文名
Purescix Multifunctional Cell Separation Medium
货号
PX10001

Purescix 多功能细胞分离液是经过多重实验验证的密度梯度离心介质，可用于细胞、病毒及亚细胞颗粒的分离制备。产品作用机理、实验操作流程与 Percoll 保持高度兼容，可作为 Percoll 的高性能等效替代试剂。

产品简介

多功能细胞分离液为经典密度梯度离心介质，由粒径 15–30 nm 胶体二氧化硅颗粒配制成水溶液；颗粒表面包覆单分子层聚乙烯吡咯烷酮（PVP），游离 PVP 含量仅 1%–2%。

产品化学惰性强、基本无细胞毒性，不与生物膜发生粘附，适用于活细胞、沉降系数≥60 S的亚细胞组分及病毒样本分离；可在 200–1000 g 低离心力条件下，数分钟至数十分钟内完成分离。整体实验条件温和，能够最大限度维持细胞活力与形态完整。

多功能细胞分离液不穿透生物膜，离心过程中不改变颗粒的浮力密度；梯度稳定性好，可提前预制，实验重现性高。分离后介质通常无需去除，不干扰流式细胞术、电子细胞计数等下游检测及后续细胞培养。

性状与指标

参数 信息
产品组成 PVP 包被的胶体二氧化硅溶液
CAS 号 65455-52-9
颗粒直径 15–30 nm
密度 1.130 ± 0.005 g/mL
渗透压 < 25 mOsm/kg H₂O
粘度 ≤ 15 cP（20°C）
电导率 < 100 mS/m
pH 8.5–9.5（20°C）
外观 无色至微黄色液体
储存条件 常温可稳定保存5年（强烈推荐2-8℃保存）
运输条件 常温运输
是否无菌 无菌

 

应用场景：

包括但不限于以下使用场景：

  • 外周血单个核细胞（PBMC）、淋巴细胞亚群分离
  • NK 细胞（大颗粒淋巴细胞 LGL）富集
  • 淋巴母细胞纯化与死细胞去除
  • 肝细胞、Kupffer 细胞、骨髓细胞等原代细胞分离
  • 线粒体、溶酶体、过氧化物酶体、细胞核等亚细胞器分离
  • 病毒、细菌分离纯化
  • 受损细胞及碎片与完整活细胞的分离

常用检测方法/平台：密度梯度离心（角转头/水平转头）、流式细胞术、细胞培养

 

下述为内部方案验证完备、可提供详细实验方案的细胞类型（详见说明书及实验指南）：

  • 肝实质细胞与肝非实质细胞
  • 全血PMBC
  • 小肠上皮免疫细胞
  • 小鼠骨髓中性粒细胞

 

附：典型生物颗粒分离密度参考

样品类型 浮力密度 (g/mL) 分离后位置
血小板(Platelet) <1.04 上层或漂浮液体表面
淋巴细胞(Lymphocyte) 1.055-1.065 中层，界面
单核细胞(Monocyte) 1.060-1.068 中下层
嗜中性粒细胞(Neutrophil) 1.080-1.090 下层
红细胞(Erythrocyte) >1.09 底部沉淀层
细胞质(Cytoplasm) <1.05 上层或漂浮
微粒体(Microsome) 1.09-1.12 中层
溶酶体(Lysosome) 1.12-1.15 中下层
线粒体(Mitochondria) 1.17-1.20 下层
细胞核(Nucleus) >1.20 最底部

表7. 常见细胞、亚细胞器在多功能细胞分离液梯度中的浮力密度及预测位置

产品数据

PBMC分离测试

取小鼠全血经 D-Hank’s 液稀释后，分别采用 Purescix PX10001 及进口同类产品开展 PBMC 分离，收集样品进行流式细胞术检测。
如图 1 所示，小鼠全血 PBMC 分离实验中，宏观分层现象与进口同类产品基本一致：血清相与分离介质之间形成富集多种免疫细胞的白膜层，红细胞沉降于管底。

图1. 进口C品牌产品（左）与Purescix PX10001（右）全血PBMC分离效果宏观对比

图2进口C品牌产品与Purescix PX10001流式细胞术检测分离免疫细胞效果

注：P1:CD45阳性，全体免疫细胞；P2:CD3阳性，T淋巴细胞；P3:CD19阳性，B淋巴细胞；P4:CD4阳性CD3阳性，CD4T淋巴细胞；P5:CD8阳性CD3阳性，CD8T淋巴细胞；P6:CD11b阳性Ly6G阴性，单核细胞；P7:CD11b阳性Ly6G阳性，中性粒细胞

总免疫细胞数 T淋巴细胞数 B淋巴细胞数 CD4T淋巴细胞数 CD8T淋巴细胞数 单核细胞数 中性粒细胞数
进口C品牌产品 7594 3939 1695 2270 1242 949 74
Purescix PX10001 17950 8719 5601 5614 2657 1597 180

表1：进口 C 品牌产品与 Purescix PX10001免疫细胞收获数对比

T淋巴细胞活率 其他类型细胞活率
进口C品牌产品 99.19% 98.96%
Purescix PX10001 99.35% 98.93%

表2：进口C品牌产品与Purescix PX10001分离免疫细胞活率统计

流式数据分析显示，同等实验条件下，使用 Purescix PX10001 分离得到的总免疫细胞数量更高，细胞活率与进口产品相当。

肝实质细胞分离测试

小鼠肝脏剔除胆囊后制备肝细胞悬液，粗肝细胞经70% PX10001等渗工作液分离，部分细胞7AAD染色流式检测活率，其余铺板37℃培养，次日观察贴壁状态。

图2 进口C品牌产品（左）与Purescix PX10001（右）分离肝实质细胞效果宏观对比

如图2分离小鼠肝实质细胞时，仅从宏观角度观察，与进口C品牌表现基本一致。最上层为死细胞，离心管底部为目标细胞。

图3进口C品牌产品与Purescix PX10001流式细胞术检测肝实质细胞分离效果

肝实质细胞数 肝实质细胞活率
进口C品牌产品 15935 91.34%
Purescix PX10001 40399 91.31%

表3. 进口C品牌产品与Purescix PX10001分离肝实质细胞数及活率统计

流式数据分析（通过颗粒大小判断）显示，同等实验条件下，使用 Purescix PX10001 分离得到的总细胞数量更高，细胞活率与进口产品相当。

图4 进口C品牌产品（左）与Purescix PX10001（右）分离肝实质细胞贴壁情况

分离得到的肝实质细胞于含10%FBS的WilliamsE培养基中过夜培养，次日拍照观察贴壁情况，发现使用进口产品和PX10001分离获得的肝实质细胞贴壁率相当。

肝非实质细胞分离测试

小鼠肝脏剔除胆囊后制备肝细胞悬液，按比例配制100%、33%、66% PX10001等渗工作液，采用双层密度梯度分离粗肝非实质细胞，离心后于两层介质界面收获活细胞白膜层。

收集细胞经洗涤后，部分样本7AAD染色流式检测活率，剩余细胞铺板37℃培养，次日观察细胞贴壁状态。

图5 进口C品牌产品（左）与Purescix PX10001（右）分离肝非实质细胞效果宏观对比

图6进口C品牌产品与Purescix PX10001流式细胞术检测肝非实质细胞分离效果

肝非实质细胞数 肝非实质细胞活率
进口C品牌产品 145104 93.77%
Purescix PX10001 100101 93.89%

表4. 进口C品牌产品与Purescix PX10001分离肝实质细胞数及活率统计

流式数据分析（通过颗粒大小判断）显示，同等实验条件下，使用PX10001分离获得的肝非实质细胞数量更高与细胞活率与进口产品相当。

图7 进口C品牌产品（左）与Purescix PX10001（右）分离肝非实质细胞贴壁情况

分离得到的肝非实质细胞于含10%FBS的DMEM培养基中过夜培养，次日拍照观察贴壁情况，发现使用进口产品和PX10001分离获得的肝非实质细胞贴壁率相当。

骨髓中性粒细胞分离测试

轻柔吹打红骨髓获得单细胞悬液，采用长针头缓慢铺制 52%、64%、72% 三层 PX10001 密度梯度（分层界面清晰）；离心后自上而下形成死细胞、淋巴 / 单核及未成熟中性粒细胞、中性粒细胞、红细胞四层。

图8 进口C品牌产品（左）与Purescix PX10001（右）分离骨髓中性粒细胞分离效果宏观对比

图9进口C品牌产品与Purescix PX10001流式细胞术检测骨髓中性粒细胞分离效果

注：P2:中性粒细胞，CD11b和Ly6G双阳；P3：单核细胞，CD11b阳性，Ly6G阴性；P4：中性粒细胞-7AAD；P5：单核细胞-7AAD

 

试管名称： 中性粒细胞数 单核细胞数 中性粒细胞占比 单核细胞占比 中性粒细胞活率 单核细胞活率
未纯化骨髓细胞混悬液 76991 17831 61.12% 14.15% 94.22% 98.26%
进口C品牌产品 282619 11204 89.79% 3.56% 99.26% 99.13%
Purescix PX10001 306509 13277 86.87% 3.76% 99.37% 99.25%

表5. 进口C品牌产品与Purescix PX10001分离肝实质细胞数及活率统计

数据分析显示，相对于未分离细胞混悬液，中性粒细胞得到一定程度富集、占比增加，且单核细胞占比显著减少。同等实验条件下，使用 Purescix PX10001 分离得到细胞数、活率与进口C品牌产品基本一致。

图10 进口C品牌产品（左）与Purescix PX10001（右）分离骨髓中性粒细胞贴壁情况

相同测试条件下，多个显微镜视野下，Purescix PX10001的细胞分布形态与竞品基本保持一致。

小鼠小肠免疫细胞分离测试

分离小鼠小肠（幽门盲肠段），剪为肠组织碎片；使用细胞提取液处理后，加入 4 mL 40% Percoll 等渗工作液，吹打混匀细胞并离心，结束后，脂肪细胞在最上层，免疫细胞在离心管底

离心收集管底富集的免疫细胞，利用流式抗体进行免疫荧光染色，完成流式检测。数据分析显示，相同的实验条件下，使用 Purescix PX10001 分离得到细胞数、活率优于进口C品牌产品。

图11. 进口C品牌产品（左）与Purescix PX10001（右）分离小鼠小肠上皮免疫细胞效果宏观对比

图12 进口C品牌产品与Purescix PX10001流式细胞术检测小肠上皮免疫细胞分离效果

总免疫细胞数 T淋巴细胞数 B淋巴细胞数 CD4T淋巴细胞数 CD8T淋巴细胞数
进口C品牌产品 26666 13301 7392 1659 9858
Purescix PX10001 35958 24992 6292 2848 19316

表6. 进口C品牌产品与Purescix PX10001分离肝实质细胞数及活率统计

 

注意事项

  1. 为了确保操作人员的安全与健康，实验全过程请务必穿戴实验服并佩戴一次性手套。
  2. 本品所附带的部分产品技术信息仅供客户参考、学术交流与科学研究之用；我司不对所提供信息的绝对权威性与完整性作担保。
  3. 本品仅供科学研究使用，严禁用于临床诊断、治疗、食品及药品等任何人体相关用途，禁止存放于普通住宅。
  4. 自发形成梯度请使用角转头，不推荐水平转头；预制梯度分离细胞时可使用水平转头。
  5. 多功能细胞分离液 原液渗透压极低（< 25 mOsm/kg），不可直接用于细胞分离，使用前必须配制为等渗工作液。
  6. 高压灭菌仅适用于未添加盐或蔗糖的 多功能细胞分离液 原液（120°C，30 min）；盐会引起糊化，蔗糖会引起焦糖化。灭菌时尽量减少与空气接触（使用窄口瓶），如有颗粒形成可过滤或低速离心去除；如有明显蒸发，用无菌水补足体积以免影响密度。
  7. 本品强烈建议2-8℃保存，- 20°C 储存最多 6 个月。
  8. 预制梯度在无菌、无物理扰动条件下可保存数周而不改变梯度形状。
  9. 本品不干扰流式细胞术和电子细胞计数仪检测，对细胞培养无明显损伤。